مطالعه مورفولوژیکی و فراساختاری تخمدان پیوندی- منجمد شده با دو روش انجماد شیشه ای Conventional و Direct cover "

Abstract

The aim of the present study was to evaluate the morphology and ultrastructure of auto transplanted mouse ovaries after cryopreservation by direct cover and conventional vitrification methods. Material and method: Ovaries from 6-8 week old Balb/c mice was removed with anesthesia. Right ovary was auto transplanted to same mice and left ovary was vitrified with two method: direct cover vitrification (DCV) and conventional vitrification (CV). vitrification solutions be prepared in 3 concentration. Ovaries were stored in liquid nitrogen for 10 minutes. For thawing, the ovaries were warmed at 25c water and 1, 0.5, 0.25 ml sucrose and then equilibrate with culture medium. Then the vitrified and fresh ovarian tissues were auto grafted intraperitoneally. After 1 month the mic were sacrificed and ovarian tissue was evaluated by LM (Light Microscope) and TEM ( Transmission electron microscopy(. Result: Ovarian tissue frozen in DCV1 and CV1 groups demonstrete a higher percentage of normal and viable follicles morphologically and ultrastructurally than tissue frozen in other groups after auto transplantation (P<0.05). There is no significant different between DCV and CV method and groups., هدف از مطالعه حاضر ارزیابی مورفولوژی و فراساختاری بافت تخمدانی منجمد شده با دوروش معمول و پوشش مستقیم بعد از پیوند اتوگرافت می باشد.مواد و روش: تخمدانهای موش Balb/c8 - 6 هفتهایی بعد از انجام بیهوشی خارج شدند.تخمدان سمت راست دوباره به همان موش پیوند زده شد و تخمدان سمت چپ با دو روش‌معمول و پوشش مستقیم منجمد شد. محلولهای انجمادی در سه غلظت متفاوت آماده شدند.تخمدان ها به مدت ده دقیقه در ازت مایع نگه داری شدند. برای ذوب کردن تخمدانها در آبC 25 و محلول ساکروز نزولی ) 1 ، 5 / 0 ، 25 / 0 مول( قرار داده شدند و سپس در محیط کشت‌به تعادل رسیدند. سپس بافتهای تخمدانی منجمد و تازه به صورت داخل صفاقی به همان‌موشها به شکل اتوگرافت پیوند شدند. بعد از یک ماه موشها قربانی شدند و بافت تخمدانیتوسط میکروسکوپ نوری و الکترونی مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: در بافت تخمدانی منجمد شده در گروه 1 CV و 1DCV قابلیت حیات و درصد فولیول -هایی که از لحاظ مورفولوژیکی و فراساختاری نرمال بودند نسبت به سایر گروهها بالاتر بود( 05 / 0P < ( تفاوت معنیداری بین روش های CV و DCV مشاهده نشد. بعد از پیوند تخمدان،آسیب زیادی به بافت تخمدان وارد شد و تفاوت معنی داری در تخمدانهای گروه انجمادی -پیوندی و شاهد پیوندی با غلظتها و روشهای مختلف انجمادی مشاهده نشد.