تاثیرهمزمان ژن درمانی با 12&GM-CSF IL- در پسرفت توده های توموری در مدل موشی

Abstract

Abstract Introduction: Immunotherapy is one of cancer treatment strategies. IL-12 and granulocyte-monocyte colony-stimulating factor (GM-CSF) have recently been used as immunotherapeutic agents in cancer gene therapy. Both IL-12 and GM-CSF are the most important cytokines in activating DCs and boosting anti-tumor immune responses. Here, we investigated the antitumor effects of combination therapy with GM-CSF and IL-12 in the regression of tumor masses in mouse model. Aim: Determination the effect of simultaneous gene therapy with IL-12 & GM-CSF in the regression of tumor masses in mouse model. Material and methods: To study the therapeutic efficacy of these two cytokines, we used tumor cells transfected with mGM-CSF and mIL12 plasmids. Then ELISA test was used to check cytokine production by transfected cells. Tumor transfected cells were injected subcutaneously to inoculate tumor in Balb/C mouse. Tumor sizes were measured by caliper. Then mouse sacrificed and tumors were extracted. The expression of GM-CSF, IL-12, IFN- were studied with Real-time PCR and immunoblotting. The expression of Ki-67 (a tumor proliferation marker) in tumor masses was studied by immunohistochemistery staining. Results: Our results demonstrated that IL-12 and GM-CSF monotherapy displayed therapeutic effects, whereas combination therapy with both cytokines displayed synergistic antitumor effects., ایمونوتراپی سرطان یکی از روش های درمان سرطان است. در سالهای اخیر از IL-12 و GM-CSF به عنوان عوامل ایمونوتراپیک در ژن درمانی سرطان استفاده شده است. IL-12 و GM-CSF دو سایتوکاین مهم در فعال سازی سلولهای دندریتیک و تقویت پاسخهای ایمنی موثر علیه سرطان می باشند. در این مطالعه تاثیر همزمان ژن درمانی با IL-12 و GM-CSF در پسرفت توده های توموری در مدل موشی مورد بررسی قرار گرفت.هدف: هدف ما از این مطالعه تعیین تاثیر همزمان ژن درمانی با GM-CSF وIL-12 در پسرفت توده های توموری در مدل موشی است.مواد و روش ها: تست الایزا به منظور بررسی تولید سایتوکاین های IL-12 و GM-CSF توسط سلول های WEHI-164 ترانسفکت شده با IL-12 و GM-CSF انجام گرفت. سپس سلولهای ترانسفکت شده با IL-12 و GM-CSF از طریق زیر جلدی به موش Balb/C تزریق شدند.اندازه ی تومور با استفاده از کولیس مورد بررسی قرار گرفت. بیان سایتوکاین های IL-12 و GM-CSF، IFN- در تومور به روش Real-time PCR و ایمونوبلاتینگ پس از استخراج توده ی توموری مورد بررسی قرار گرفت. بیان پرولیفراسیون مارکرKi67 در توده ی توموری با استفاده از روش ایمونوهیستوشیمی مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: نتایج بدست آمده از ایمونوبلاتینگ و Real-time PCR و ایمونوهیستوشیمی نشان می دهد، ژن درمانی با IL-12 و GM-CSF در پسرفت توموری موثر بوده، ولی ژن درمانی همزمان با IL-12 و GM-CSF باعث ایجاد پاسخهای آنتی توموری قوی گردید.