اثرات سایتوتوکسیک عصاره گیاهان دارویی گل میمونی ساقه گوش(Scrophularia amplexicaulis) و گل میمونی شاه بیلیoxysepala) (Scrophularia در القای آپوپتوز در سلولهای سرطانی MCF-7,WEHI-164

Abstract

This study is the first to investigate the cytotoxic and apoptotic effects of Scrophularia amplexicaulis and Scrophularia oxysepala extracts in MCF-7 human breast carcinoma cell line and WEHI-164 fibrosarcoma cell line. Three extracts of Scrophularia amplexicaulis and Scrophularia oxysepala including the n-hexane, dichloromethane and methanol extracts were examined. MTT and Trypan-blue assays were performed to analyze the cytotoxic activity ofScrophularia oxysepala and Scrophularia amplexicaulis extracts. The apoptosis inducing action of dichloromethane and methanol extracts was evaluated by cell death assay, TUNEL assay, Western blot and Real-Time PCR. The n-hexane extracts had no cytotoxic effectsbut dichloromethaneand methanol extracts significantly killed cancer cells in a dose and time dependent manner. Furthermore, dichloromethane extracts had more potent cytotoxic effects than the methanol extracts. TUNEL assay revealed apoptotic characteristic (DNA fragmentation) in the extracts-treated cells.Western blot analysis showed cleavage of PARP. Furthermore, Real-Time PCR analysis showed the mRNA expression level of caspase-3, p-53 and c-myc increased in the cells treated with the extracts., هدف از این مطالعه، بررسی اثرات سایتوتوکسیک عصاره گیاهان دارویی گل میمونی ساقه گوش(Scrophularia amplexicaulis) و گل میمونی شاه بیلیoxysepala) (Scrophularia در القای آپوپتوز در سلولهای سرطانی MCF-7,WEHI-164 می باشد.تست MTT و تریپان بلو برای بررسی اثرات سایتوتوکسیک عصاره هایScrophularia oxysepala وScrophularia amplexicaulisانجام گرفت. القاء آپوپتوز با Cell Death assay، تست تانل، وسترن بلات و Real-time PCRبررسی شد.عصاره ان- هگزانی فاقد اثر سایتوتوکسیک بود، در حالی که عصاره های دی کلرومتانولی و متانولی به طور معنی داری سلولهای سرطانی را از بین بردند. همچنین عصاره های دی کلرومتانولی در مقایسه با عصاره های متانولی دارای اثرات سایتوتوکسیک بیشتری بودند. با تست تانل یکی از مشخصات آپوپتوز (DNA fragmentation) در سلولهای تیمار شده با عصاره ها مشخص شد. آنالیز وسترن بلات وجود قطعات PARP را نشان داد، همچنین مطالعه بیان ژن های caspase-3, p-53, c-myc با استفاده از Real-time PCR نشان داد که میزان بیان این ژن ها در سلولهای تیمار شده با عصاره هاافزایش می یابند.