بررسی اثر PPAR و مسیر علامت دهی ERK - MAPK بر بیان ژن های 6 و 9 دساتوراز و ترکیب اسیدهای چرب در رده ی سلولی HepG2

Abstract

The aim of the present study was to evaluate the role of PPAR and MAPK signaling pathway and their crosstalk in 6 and 9 desaturase gene expression regulation fatty acid composition in hepatocellular carcinoma cell line HepG2. MATERIAL and METHODS: HepG2 Cells in RPMI-1640 medium culture (FBS%10) were treated with WY-14643 as PPAR synthetic agonist, PD98059 as MAPK pathway inhibitor and and AG1478 as EGFR inhibitor. Forty-eight hours after treatment, total RNA was isolated and reverse transcribed from treated cells. Changes in gene expression were determined using RT-PCR. And fatty acid composition of cells was determined by gas-liquid chromatography technique. RESULTS: Expression of both genes, 6D (P=0.03) and 9D (P=0.01) increased after treatment. Simultaneous treatment increased the expression of both genes, 6 (P=0.02) and 9 (P=0.04). Cellular fatty acid composition was also changed so that fatty acids have a double bond (MUFA) increased (P=0.01) by treatment with the WY-14643 and PD98059.But the double bond of polyunsaturated fatty acids (PUFA) decreased., در این تحقیق، با استفاده از آگونیست PPAR و مهار کننده مسیر علامت دهی MAPK شواهدی فراهم آورده است که نقش PPAR و مسیر علامت دهی MAPK را در بیان ژن های دساتوراز و ترکیب اسیدهای چرب سلولی در رده سلولی کارسینومای کبدی HepG2 را نشان می دهد.مواد و روش ها: سلول های HepG2 در محیط RPMI1640 کشت داده شدند. سپس توسط WY-14643 آگونیست PPAR، PD98059 و AG1478 مهار کننده مسیر علامت دهی MAPK و EGFR به مدت 48 ساعت تیمار شدند. تغییرات بیان ژنی به روش RT-PCR و ترکیب اسید های چرب سلولی به روش گاز کروماتوگرافی اندازه گیری شد.نتایج : بیان هر دو ژن (P=0.03) 6 و(P=0.01) 9 بدنبال تیمار با افزایش یافت. تیمار همزمان WY-14643 و PD98059 باعث افزایش بیان هر دو ژن (P=0.02) 6 و(P=0.04) 9 شد. ترکیب اسیدهای چرب سلولی نیز تغییر یافت بطوریکه مقدار اسیدهای چرب دارای یک پیوند دوگانه (MUFA) در اثر تیمار با WY-14643 و PD98059 افزایش یافت (P=0.01) ولی مقدار اسیدهای چرب دارای چند پیوند دوگانه (PUFA) کاهش یافت.