بررسی اثر اگزوزوم های مشتق شده از سرم بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان بر روی لنفوسیت های T

Abstract

هدف از این مطالعه، بررسی اثر اگزوزوم های مشتق شده از سرم بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان بر روی لنفوسیت‌های T می‌باشد. روش کار و مواد: از افراد نرمال نمونه خون گرفته شد و با استفاده از فایکول 1.077 سلول‌های تک هسته‌ای خون (PBMC) جدا سازی گردید. برای جداسازی لنفوسیت‌های T از آنتی‌بادی ضد CD11b، CD16، CD19، CD36 و CD56 به منظور حذف سلول‌های دندریتیک، مونوسیت ها، گرانولوسیت ها، سلول‌های B، پلاکت‌ها، سلول‌های پیش ساز اریتروئید و NK استفاده شد. سپس، با استفاده از کیت مخصوص جداسازی اگزوزوم از سرم و طبق پروتوکل کیت اگزوزوم از سرم بیماران اسپوندیلیت انکلیوزان جداسازی شد. اندازه‌گیری بیان سایتوکاین های زیر گروه‌های لنفوسیت‌های T قبل و بعد از ترانس فکت شدن با اگزوزوم های خارج شده از سرم بیماران مبتلا به اسپوندیلیت با استفاده از تکنیک Real Time-PCR ارزیابی گردید. نتايج: داده‌های مربوط به PCR RT و ELISA نشان داد که میزان بیان فاکتورهای رونویسی Th17 (RORγt و STAT3) و Th1 (T-bet) به ترتیب افزایش یافتند. همچنین، غلظت و میزان بیان سیتوکین های Th1 (IL-17، IL-23، TNF-α و INF-γ) به طور قابل توجهی در گروهی که با سلول‌های T اگزوزومی از بیماران مبتلا به AS تحت درمان قرار گرفتند، افزایش یافتند. از طرف دیگر، میزان بیان فاکتور رونویسی Treg (FOXP3) و سیتوکین ها (TGF-β و IL-10) کاهش نشان دادند.