بررسی اثرات ضد رشد سلولی کوئرسیتین بر روی رده سلول سرطانی پانکراس در شرایط in vitro و تاثیر آن در میزان بیان برخی microRNAs

Abstract

سرطان پانکراس از کشنده‌ترین بدخیمی‌ها می‌باشد. ماهیت مقاوم آن نیاز به ترکیبات دارویی جدید با عوارض کمتر برای ترکیب با رژیم‌های شیمی‌درمانی را افزایش می‌دهد. به نظر می‌رسد که کوئرستین فلاونوئیدی با خواص عالی برای این منظور باشد. microRNA ها -مولکول‌های RNA کوچک و غیرکدکننده- بیان ژن‌ها را تنظیم می‌کنند. آنها می‌توانند به عنوان اهداف درمانی در سرطان ها استفاده شوند. کوئرستین ممکن است اثر داروهای شیمی‌درمانی را بر روی پروفایل microRNAها در سرطان پانکراس در شرایط in-vitro بهبود بخشد. اهداف: این مطالعه با هدف بررسی اثر ترکیب کوئرستین با داروی 5-فلورواوراسیل در رده سلولی سرطان پانکراس بر میزان بیان microRNAها منتخب انجام شد. روش ها: سمیت سلولی کوئرستین بر روی رده سلولی سرطان پانکراس با روش MTT بررسی شد. سپس RNA کل از سلول ها در چهار گروه (شاهد، درمان با کوئرستین، درمان با 5-فلورواوراسیل و درمان با ترکیب کوئرستین و 5-فلورواوراسیل) استخراج شد. پرایمرهای اختصاصی برای 5 microRNA منتخب طراحی شد. سپس cDNA اختصاصی برای آنها تهیه شد. میزان بیان microRNAها با استفاده از روش Real-Time PCR بررسی شدند.یافته‌ها: میزان IC50 کوئرستین 50 µM تعیین شد. نتیجه Real-time PCR به شرح زیر است: سطح بیان miR-21 و miR-155 در همه گروه ها به طور قابل توجهی نسبت به گروه کنترل کاهش یافت. بیان miR-133 در گروه ترکیبی به طور قابل توجهی افزایش یافت. miR-181 تغییر معنی داری نشان نداد. miR-451 در همه گروه ها افزایش یافت. ژن c-Myc به عنوان هدف مشترک این microRNAها انتخاب شد. هر دو تست Real-time PCR و Western Blot کاهش معنی داری را برای این ژن و پروتئین حاصل از آن در همه گروه ها نسبت به گروه کنترل نشان دادند. نتیجه‌گیری: بر اساس نتایج، کوئرستین می تواند اثر داروی 5-فلورواوراسیل را در رده سلولی Mia-PaCa-2 تقویت کند.