مهار بیان ژن HMGA2 ( (High mobility group A بوسیله Short) siRNA interference RNA) برروی سلول های رده HCT116 درسرطان کولورکتال

Abstract

هدف از این مطالعه، بررسی اثر اختصاصی sirRNA برروی ژن HMGA2، القای آپوپتوز و مهار چرخه سلولی در رده سلولی HCT116 است. سلول های آدنوکارسینومای HCT116 با sirRNA اختصاصی HMGA2 و با استفاده از رویکرد لیپوزوم ترانسفکت شدند. سطح بیان mRNA HMGA2 از طریق RT PCR و میزان پروتئین HMGA2 از طریق روش وسترن بلات اندازه گیری شدند. میزان افزایش حساسیت و کشندگی sirRNA از طریق آزمایش MTT بررسی شده و اثر القا مرگ سلولی و آنالیز چرخه سلولی به ترتیب توسط آزمایش TUNEL و فلو سایتومتری اندازه گیری گردید. در سلول های HCT116 48 ساعت بعد از ترانسفکت و روش وابسته به دوز با sirRNA اختصاصی HMGA2 سطح بیان ژن HMGA2 و پروتئین مربوطه به طور موثری کاهش یافت. بعلاوه ترانسفکت با sirRNA اختصاصی بر روی زیست پذیری سلول ها اثر داشت و منجر به افزایش میزان آپوپتوز گردید. همچنین در این مطالعه، نشان داده شد که انتقال sirRNA اختصاصی HMGA2 منجر به توقف چرخه سلولی در فاز G2/M اینترفاز گردید.