القای آپوپتوز در رده سلولی MOLT-4 با استفاده از TRAIL و SAHA و بررسی مکانیسم های داخل سلولی مقاومت به TRAIL

Abstract

لوسمی لنفوبلاستیک حاد سلول T یک تومور لنفوئیدی با سرعت پیشرفت سریع و عوارض بالا است. TRAIL را می توان به عنوان یک استراتژی جدید برای القای آپوپتوز در سلول های سرطانی بدون آسیب رساندن به سلول های سالم طبیعی استفاده کرد، اما تقریباً نیمی از سلول های سرطانی از طریق مکانیسم های مختلف نسبت به این عامل مقاومت نشان می دهند. مهارکننده های هیستون داستیلاز مانند SAHA را می توان برای افزایش حساسیت سلول های سرطانی به آپوپتوز ناشی از TRAIL استفاده کرد. در این مطالعه، ما این فرضیه را بر روی سلول های سرطانی MOLT-4 آزمایش کردیم. مواد و روش ها: ابتدا IC50 برای SAHA با استفاده از روش MTT تعیین شد. سپس سلول ها به شش گروه شامل گروه کنترل، TRAIL 50 nM ، TRAIL 100 nM ،SAHA 2 µM ، SAHA 2 µM + TRAIL 50 nM و SAHA 2 µM + TRAIL 100 nM تقسیم شدند. سپس، میزان آپوپتوز با فلوسیتومتری با رنگ آمیزی Annexin-V و PI پس از 24، 48 و 72 ساعت ارزیابی شد. بیان ژن‌های c-flip، DR4، DR5، CHOP، NF-kB، STAT3، Akt، و PI3K با روش کمی real-time PCR ارزیابی شد. داده‌ها با استفاده از آنالیز واریانس دوطرفه با آزمون‌های مقایسات چندگانه توکی و دانت مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت و مقادیر p کمتر از 05/0 از نظر آماری معنی‌دار در نظر گرفته شد. یافته‌ها: مشخص شد که ترکیب SAHA با TRAIL، آپوپتوز را در سلول‌های MOLT-4 با افزایش بیان DR4، DR5 و CHOP و کاهش بیان ژن‌های c-flip، STAT3، PI3k، Akt و NF-kB افزایش می‌دهد.