بررسی اثر مهار ژن های BMP4 و P21 با SiRNA کمپلکس شده با اگزوزوم بر مسیر پیام رسانی Wnt و تمایز سلول های بنیادی عصبی SH-SY5Y
Loading...
Date
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
دانشگاه علوم پزشکی تبریز، دانشکده پزشکی
Abstract
هدف اصلی این مطالعه، بررسی کارایی اگزوزم ها در انتقال موثر siRNA های BMP4 و P21 به سلول SH-SY5Y می باشد.
مواد و روش ها: اگزوزوم ها با اولتراسانتریفیوژ از محیط کشت سلول SH-SY5Y استخراج شدند و با استفاده از کیت ExoFection با siRNA ها مورد تست بارگیری شدند و سپس برای تعیین اثر siRNA ژن های BMP4 و P21 بر میزان بیان ژن های BMP4، P21 ، NeuroD1 و Prox1 در سلول های SH-SY5Y از روش Real Time PCR و Western blot استفاده گردید.
یافته ها: وجود مارکرهای اگزوزومی CD63 و CD9 با تکنیک فلوسایتومتری تائید گردید. اندازه اگزوزوم ها با DLS، 23/49 ± 43/8 نانومتر بدست آمد. نتایج ما نشان داد که سمیت اگزوزوم در مقایسه با لیپوزوم به طور معنی داری کم بود (p<0.0005) . ارزیابی سطح بیان ژن در سلول SH-SY5Y، افزایش معنی داری در بیان ژن های ProX1 و Neuro D1 نشان داد.